domingo, 10 de noviembre de 2013

Hibridacion en el cancer de Estomago

Detección de aneuploidías del cromosoma 17 y deleción del gen TP53 en una amplia variedad de tumores sólidos mediante hibridación in situ fluorescente bicolor 

Introducción. El TP53 es un gen supresor de tumores localizado en la región cromosómica 17p13.1; controla el ciclo celular y se encuentra alterado en cerca de 50% de todas las neoplasias.  

Materiales y métodos. Se analizaron 38 muestras de diversos tipos de tumores sólidos primarios. Todas las muestras se disociaron mecánica y enzimáticamente con colagenasa al 0,2%, antes de la obtención de los núcleos interfásicos. La técnica de FISH-bicolor se realizó en núcleos interfásicos, mediante sondas marcadas directamente con fluorocromos para el centrómero del cromosoma 17 (CEP 17; señal verde; VYSIS) y para el locus específico del gen TP53 (LSI 17p13.1; señal naranja; VYSIS). 


Resultados. Se encontró que 63% (24/38) de las muestras tenían aneuploidías del cromosoma 17. La monosomía fue la aneuploidía más frecuente (75%; 18/24), seguida de la trisomía (17%; 4/24); la nulisomía y la tetrasomía fueron menos frecuentes. El 89,5% (34/38) de los casos presentaron deleción del gen TP53. Sólo cuatro casos fueron normales para el número de copias del cromosoma 17 y del gen TP53. El estudio histopatológico mostró que la mayoría de las muestras eran tumores malignos.
Conclusiones. La aneuploidía del cromosoma 17 y la deleción en el locus 17p13.1 del gen TP53 son alteraciones muy frecuentes en los tumores sólidos. La técnica FISH-bicolor permite detectar simultáneamente alteraciones cromosómicas numéricas y estructurales en núcleos interfásicos.


BIBLIOGRAFIA

http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0120-41572010000300012&script=sci_arttext&tlng=es
 
 

domingo, 3 de noviembre de 2013

PCR PARA CANCER GASTRICO

Valoracion de una tecnica no invasiva para estudiar la colonizacion por Helicobacter pylori (Cancer Gastrico)
Objetivo:
Demostrar la existencia de un metodo no invasivo para determinacion de Helicobacter pylori
Muestra: Heces Fecales
Tipo de ADN: ADN microbiano.
Extraccion del ADN segun el metodo del CTAB.
Gen: 411 pb del gen de la subunidad A de la Ureasa.
PCR standar
Desnaturalizacion: 5 min a 94°C
Hibridacion: 1 min a 94°C,  1 min 45°C y 1 min a 72°C
Extencion: 5 min a 72°C

La principal ventaja de esta novedosa tecnologia frente a los novedosos metodos tradicionales reside en detectar de una manera confiable rapida y efectiva el ADN  de dicho germen en muestras bucales, fecales y gastricas.
https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEi0EFl-uqTP-Nr4AUorAFgo-FUEt9BLzxP34PhQZi95LpOJXp_pY6K6Se-Ey2jCy_3y1C_fvTciD0_hbwlwR7iPWf9PpF87EB0gWUsn7uqfQnjuKFGdzGJHwjwEOCMHMtP21IIV2i3z4XE/s1600/h+pylori.png

BIBLIOGRAFIA: Articulo de metodos no invasivos en el cancer de estomago
https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEi0EFl-uqTP-Nr4AUorAFgo-FUEt9BLzxP34PhQZi95LpOJXp_pY6K6Se-Ey2jCy_3y1C_fvTciD0_hbwlwR7iPWf9PpF87EB0gWUsn7uqfQnjuKFGdzGJHwjwEOCMHMtP21IIV2i3z4XE/s1600/h+pylori.png


domingo, 27 de octubre de 2013

INTERPRETACION DE LA MUESTRA BIOLOGIA SEGUN EL ARTICULO

Se analizaron 36 muestras de liquido cefaloraquideo de pacientes con sospecha de meningitis
Se debe hacer la extraccion de mínimo 0.2 ml. Los materiales de extracción y tubos deben ser nuevos y estar estrictamente estériles. Las muestras deben conservarse a 4oC por un tiempo no mayor de 24 horas.
En el procedimiento de interpretacion (para descubrir el agente infeccioso) de la muestra se deben realizar los siguientes pasos:
LISIS CELULAR:Se realiza por procesos fisicos y quimicos para la obtencion de ADN
SEPARACION: Se realiza con contenidos quimicos con el objetivo de separar las proteinas del ADN.
PURIFICACION DEL ADN: Se realiza principalmente con Etanol
ANALISIS: Se realiza por espectofotometria o por electroforesis.
La muestra de LCR se procesaran para cultivo bacteriologico y micologico convencional y para cultivo virologico en diferentes lineas celulares.
En  pacientes inmunodeprimidos se realiza la tecnica de deteccion de antigeno de Cryptococus neoformans mediante aglutinacion con la tecnica CALAS.
El PCR Herpler es un PCR Multipler que amplifica una secuencia del gen del ADN polimerasa
LCR patologico es el que tiene mas de 5 cel/ul o mas de 45 g/dl de proteinas